ABSTRACT: Torque Tenovirus (TTV) was first identified in patients with post transfusional hepatitis of unknown etiology. It is a ubiquitous virus and highly prevalente in the general po ulation, so far it is essentially considered a virus without patogenic potential. Although several studies sugges ting that TTV infection occurs early in childhood, the timing of the infection has not been fully elucidated. The objective of this s tudy was to compare the detection of TTV in blood and saliva in children under 3 years, to determine the frequency of this infection in this group of children and to detect any case of congenital infection through ne onatal scre en ing.To carry out this st udy , saliva samples were collected from newborns (congenital infection) and children under three years of age (pos t n atal infection) at São Francisco Xavier Hospital (CHLO). It was used an in house real time PCR methol ogy in th e 75 00 Fast Real Time PCR (App lie d Biosystems). For DNA extraction we used the “Pure Link Genomic DNA Minikit” (Invitrogen). The selecte d primers were designed for a highly conserved segment of the untranslated region (UTR) of the viral genome, al lowing to d et ect most of TTV sequences de scribed to data. A total of 244 saliva samples were analyzed, 13 8 samples from newborns and 106 samples from children aged 1 to 3 years. Twenty plasma samples along with saliva were also tested among children under 3 years old to compare the detection of TTV in blood and saliva. We found a correlation in the results obtained for TTV in plasma and saliva samples and confirmed the high prevalence of TTV (75.5%) in children aged 1 to 3 years, although in newborns a low prev al en ce of 3.6% was detected, however it was not possible to conclude whether this was a congenital infection, so further studies will be necessary to assess the prevalence of congenital infection by this virus in portuguese population.

RESUMO: O vírus Torque T eno (TTV), foi identificado pela primeira vez em paci entes com hepatite pós transfusional, de etiologia desconhecida. É um vírus ubiquitário e altamente prevalent e na população em geral, sendo que até ao momento, é essencialmente considerado um vírus desprovido de potencial patogénico. Apesar de vário s e stud os apontarem para que a infeção por TTV ocorra numa fase precoce da infância, o momento em que esta ocorre ainda levanta algumas dúvidas.Os objetivos deste estudo foram comparar a deteção do TTV no sangue e saliva, em crianças abaixo dos 3 anos, determinar a frequência desta infeção neste grupo de crianças e detetar eventuais casos de infeção congénita a través do rastreio neonatal.Para a realização deste estudo , foram colhidas amostras de saliva em recém nascidos (infeção congénita ) e em crianças abaixo dos três anos de idade (infeção pós natal), no Hospital São Francisco Xavier CHLO). Foi utilizada uma metodologia de PCR em tempo real in house , usando o 7500 Fast Real Time PCR da Applied Biosystems. Para a extração do DNA, utili zo u se o kit Pure Link Genomic DNA Minikit” da invitrogen. Os primers selecionados , desenhados para um segmento altamente cons ervado da região não modificadora (UTR U ntranslated R egion) do genoma viral, permitem detetar a maioria das sequências de TV descritas até a o momento. Foram analisadas um total de 244 amostras de saliva,138 de recém nascidos e 106 de crianças entre 1 e 3 anos de idade. Foram ainda testadas 20 amostras de plasma a par com amostras e saliva em crianças abaixo dos 3 anos, para comparar a deteção do TTV no sangue e na saliva. Verificamos a existência de correlação nos resultados obtidos para o TTV nas amostras de plasma e saliva e confirmámos a elevada prevalência do TTV (75 .5 %) nas crianças de 1 a 3 anos. Nos recém nascidos foi detetada uma baixa prevalência de 3.6%3.6%, mas não foi possível concluir se se trata de infeção congénita pelo que serão necessários estudos adicionais para se avaliar a presença de infeção congénita por este vírus na população portuguesa.